Абстрактный

В этом отчете представлен подробный технический анализ токсикологического и генотоксикологического профиля кислых олигосахаридов, полученных из пектина- (ПАОС), особой формы модифицированного цитрусового пектина. Анализ основан на комплексной оценке безопасности, проведенной Garthoff et al. вНормативная токсикология и фармакология (2010).¹Ключевые области внимания включают физико-химические характеристики материала и профиль чистоты, критическую интерпретацию расходящихся различий.

in vitroпротивв естественных условияхданные о генотоксичности и выяснение механизма видовой-специфической уротелиальной гиперплазии, наблюдаемой на моделях грызунов. Совокупность данных устанавливает надежный профиль безопасности этого нового пребиотического ингредиента.

Характеристика материала и профиль чистоты

Препарат ПАОС, оцененный в основных исследованиях безопасности, был произведен из пектина пищевого качества с помощью специального ферментативного метода. В этом процессе используются поли(метоксил- -галактуронид)лиаза (EC 4.2.2.10) и поли(1,4-альфа-D-галактуронид)гликангидролаза (EC 3.2.1.15), оба полученные из не-патогенных, нетоксигенных штаммовАспергилл Нигер.¹Полученный продукт представляет собой смесь линейных олигомеров галактуроновой кислоты, ключевые характеристики которой включают содержание галактуроновой кислоты 62 г/100 г, молекулярную массу преимущественно ниже 3800 Да (94 г/100 г) и степень метилирования 50.¹

Для любого материала, предназначенного для пищевых или исследовательских целей, профиль чистоты имеет первостепенное значение. Партия ПАОС, использованная в исследованиях, была тщательно проанализирована на наличие загрязнений и остатков. Уровнимодифицированный цитрусовый пектин, тяжелые металлыСодержание других загрязнителей было исключительно низким, что соответствует принципам соответствующего законодательства и надлежащей сельскохозяйственной практики.¹Краткое изложение этих выводов представлено ниже.

Данные взяты из Garthoff et al., 2010.¹

Низкое содержание основных тяжелых металлов, таких как кадмий, свинец и ртуть, в микрограммах-на-килограмм, подчеркивает чистоту сырья и производственного процесса.

Критический анализ данных о генотоксичности

Оценка генотоксичности ПАОС дала результаты, которые подчеркивают важность рассмотрения полной токсикологической картины, особенно взаимосвязи междуin vitroив естественных условияхданные. По данным анализа обратной мутации бактерий (тест Эймса) PAOS не оказался мутагенным для пяти штаммов с метаболической активацией и без нее.¹

Однакоin vitroанализы клеток млекопитающих дали более сложные результаты. Анализ мышиной лимфомы был признан «двусмысленным» из-за положительных ответов при высокоцитотоксических концентрациях, которые не были воспроизводимы и не имели четкой зависимости «доза-ответ».¹Аналогичным образом, в тесте на хромосомные аберрации с использованием клеток CHO PAOS первоначально считался кластогенным в условиях непрерывного лечения. Последующее-расследование показало, что этот эффект сильно зависел от цитотоксичности и используемого растворителя (ДМСО). Когда ПАОС суспендировали в культуральной среде-более физиологически значимом носителе-, значительное увеличение количества аберрантных клеток наблюдалось только при самой высокой рекомендованной дозе (

5000 мкг/мл) и был связан с высокой цитотоксичностью (МИ 34%), что привело авторов к выводу, что это не имеет биологического значения.¹Эти данные свидетельствуют о положительном

in vitroрезультаты, вероятно, были артефактами, вызванными цитотоксичностью, известным искажающим фактором в таких анализах.

Окончательный профиль безопасности in vivo

Наиболее физиологически значимые данные для оценки генотоксического риска получены изв естественных условияхисследования. Микроядерный тест был включен в 13-недельное исследование субхронической пероральной токсичности на крысах, дизайн которого обеспечивает длительное воздействие тестируемого вещества и его метаболитов. Исследование, которое также включаловнутриутробноНа этапе воздействия было продемонстрировано, что PAOS не влияет на здоровье родителей, фертильность, воспроизводство или характеристики щенков.¹Самое главное, анализ клеток бедренного костного мозга крыс из группы, получавшей высокие-дозы (10 % ПАОС в рационе, потребление, превышающее

7 г/кг массы тела/день) не выявило увеличения среднего количества микроядерных полихроматических эритроцитов по сравнению с контролем.¹Кроме того, соотношение полихроматических и нормохроматических эритроцитов не изменилось, что указывает на отсутствие цитотоксичности для костного мозга.¹Этот негатив

в естественных условияхРезультат дает убедительные доказательства того, что ПАОС не обладает генотоксической активностью в физиологических условиях.

Механистическое объяснение видового-специфического артефакта

Суб-хроническое исследование выявило диффузную уротелиальную гиперплазию у крыс, получавших 10% ПАОС. Предполагалось, что это не показатель прямой токсичности олигосахаридов, а вторичный эффект. Дополнительное механистическое исследование было разработано для проверки гипотезы о том, что гиперплазия была вызвана одновременным увеличением концентрации натрия и pH в моче, состоянием, которое, как известно, вызывает этот специфический эффект у крыс.¹Исследование включало группу, которой давали 10% ПАОС плюс подкисляющий агент.

NH4​Cl. Результаты были однозначными: низкий pH мочи в группе NH4​Cl.полностью предотвращало развитие уротелиальной гиперплазии.¹Это подтвердило механизм и продемонстрировало, что этот эффект не свойственен PAOS, а представляет собой-специфический артефакт физиологии мочеиспускания, который не считается существенным для человека.¹

Строгость, продемонстрированная в этих исследованиях, отражает научную приверженность таких ведущих производителей, как Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. Являясь национальным высокотехнологичным предприятием, сотрудничающим с университетами высшего-уровня, компания уделяет приоритетное внимание не только производству, но и глубокому научному пониманию своей продукции. Использование усовершенствованного ферментативного гидролиза на предприятии, сертифицированном по стандарту GMP- класса 100 000, обеспечивает производство продуктов высокой чистоты.модифицированный цитрусовый пектинподходит для требовательных исследований и разработок. Чтобы запросить технические характеристики, сертификат анализа или обсудить сотрудничество в области исследований, свяжитесь с wilson@zjgykp.com.

Вывод: хорошо-хорошо изученный ингредиент для исследований и разработок

Модифицированный цитрусовый пектин (ПАОС) — это материал с тщательно изученным и благоприятным профилем безопасности. Полные данные показывают, что он не-мутагенен.в естественных условияхи потенциальные опасения со стороныin vitroанализы были объяснены артефактами цитотоксичности. Наблюдение гиперплазии уротелия у крыс было механически объяснено как видоспецифическая реакция на изменение химического состава мочи и не имеет отношения к человеку. Высокая чистота материала и чрезвычайно низкий уровень содержания примесей, включая тяжелые металлы, делают его-хорошо изученным и надежным ингредиентом для дальнейших исследований и разработок в области питания и фармакологии.

Цитируемые работы

безопасность пектина 1.pdf